生物样品前处理的好坏,往往决定了后续实验的可靠性和准确性,而实在头疼,在处理生物样品时,到底该如何选择前处理方式?在这边给大家分享两个方法,分别为“需求法”和“逻辑法”。
“需求法”
首先明确需求:
延长色谱柱寿命?去除颗粒?去除蛋白?去除磷脂?去除盐分?溶剂切换?萃取目标化合物?浓缩?
其次根据需求选择方法:
依据下图横纵坐标对应的需求和方法进行选择。
举例说明:案例一
第一:明确需求
如,此次实验前处理的目的是:
1、去除蛋白
2、延长色谱柱寿命
3、萃取同极性的目标化合物
第二:依据上图,选择前处理方法
由上至下,以第一需求为准
如:“浓缩”不需要,“萃取目标化合物”不需要,“”,则选择“固相支撑液液萃取法”
举例说明:案例二
第一:明确需求
如,此次实验前处理的目的是:
1、去除蛋白
2、去除颗粒
3、去除盐分
第二:依据上图,选择前处理方法
由上至下,以第一需求为准
如:“浓缩”不需要,“萃取目标化合物”需要,“溶剂切换”不需要,“去除盐分”需要,则选择“固相支撑液液萃取法”
注意:
固相萃取法与固相支撑液液萃取法同样可达到萃取目标化合物的目的,不同之处在于:固相萃取法——萃取类似结构化合物;固相支撑液液萃取——萃取类似极性化合物。因此,固相萃取法更为精准,固相支撑液液萃取法更为普适。
“逻辑法”
在面对多样的前处理产品时,可通过4 个问题:“是否需要除蛋白”、“是否需要除磷脂”、“是否有基质干扰”、“是否为极性化合物”,再结合下图的流程图,即可快速选择出最适合的前处理方法及对应的产品。
依据下图的逻辑进行一一判断:
“需求法”与“逻辑法”各有各的优势,每个人可以根据自身的思维习惯选择最适合自己的方法。
但是无论选择合作方法,还是需要明确做前处理的内核是什么,才能进行更好的选择。