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Q: 液相色谱流动相的作用以及要求?
A: 液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间物质交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下特点:
1.    纯度:流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。溶剂所含杂质在柱上积累,会影响色谱柱的使用寿命。
2.    溶解度:样品的溶解度要适宜如果溶解度,如果溶解度欠佳样品会在柱头沉淀,不但影响纯化分离,还会缩短柱子的使用寿命。
3.    粘度要低(应<2cp)高粘度溶剂会影响溶质的扩散、传质,降低柱效,还会使柱压降增加,使分离时间延长。选择沸点在100℃以下的流动相。
4.    样品易于回收。应选用挥发性溶剂。
5.    pH:采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相的pH值,以抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。
 

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