手性化合物的对映体之间有许多相同的理化性质,如熔点、溶解度、发生相同类型的化学反应等等,同时也有一些理化性质有极大的差异,如旋光性、气味、与手性物质相互作用产生不同的产物等,特别是许多与生物体密切相关的生化反应,均和化合物的手性相关联。为深入研究手性化合物对映体各种性质的异同,其拆分研究成为相关后续研究的基础,对相关科研来讲具有不可轻视的重大意义。
常见手性拆分的方法主要分为两大类:一类是非色谱法,包括结晶、萃取、酶促法;另一类为色谱法,包括薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱、超临界流体色谱、毛细管电泳法等。超临界流体色谱(SFC)具有简单、高效、易于变换操作条件等优点,已成为和高效液相色谱(HPLC)及气相色谱(GC)互为补充的拆分方法,相对比下,超临界流体因其具有独特的优越性,应用前景极为广阔。
1、手性筛选系统对奥美拉唑消旋体拆分
Nexera UC系列中的手性筛选系统专为手性化合物拆分所设计,专用的方法开发软件可以自动控制4种改性剂任意比例混合以及最多12种色谱柱自动切换,便捷的操作方式使得手性拆分工作变得简单高效。
奥美拉唑是第一个问世的质子泵抑制剂,为消化系统用药,用于抑制胃酸和保护胃黏膜。奥美拉唑分子中具有手性亚砜结构,故而为一对异构体,常用的奥美拉唑为外消旋体。研究发现,左旋异构体S-奥美拉唑也称为埃索美拉唑,具有更优的药效和更低的毒副作用。
手性拆分专用方法开发软件
分析结果的对比显示和基于色谱分离参数的结果评价,方便快速找到适合的分离方案。奥美拉唑手性异构体在甲醇为改性剂时,Chiralcel OZ-3色谱柱有更优的分离表现。
手性农药戊唑醇拆分方法探索
戊唑醇是一种广谱高效的杀菌剂,既可对植物体外部的病原菌有防治作用,也可以随着在植物体内部的传导杀死内部病原菌。戊唑醇分子中含有一个手性中心,含一对对应异构体,文献报道其对映体的抗菌活性存在明显差异,得到单一构型的戊唑醇成为必要。使用岛津Nexera UC SFC-UV系统,对戊唑醇的两个异构体进行分离,分别考察了色谱柱、改性剂、柱温及压力对分离的影响。
实验考察了Daicel的6款键合型手性色谱柱IA-3、IC-3、ID-3、IE-3、IF-3、IG-3,在scCO2-MeOH、scCO2-EtOH、scCO2-IPA体系中对戊唑醇样品进行分析,根据结果中峰形和分离度评价方案,选择在乙醇和甲醇作为改性剂时均色谱表现良好的IE-3型色谱柱,并进一步改变超临界流体的条件来优化分析结果。
不同比例乙醇作为改性剂时戊唑醇在IE-3型色谱柱上的保留行为
少量作为改性剂的极性有机溶剂的加入可以明显的增大超临界流体的极性,进一步影响化合物在色谱柱上的保留行为。乙醇在分离体系中的比例从5%上升至15%时,超临界流体对戊唑醇的一对手性异构体洗脱能力明显增强。另外,在超临界流体的临界点附近即使小幅度改变超临界流体的温度和压力也可以显著改变超临界流体的密度从而亦对分离产生影响。
超临界流体温度变化对戊唑醇保留行为的影响
超临界流体压力变化对戊唑醇保留行为的影响
如此处超临界流体温度升高和压力增大可引起超临界流体密度的增大,由于密度增大可引起溶剂化能力增强,进而色谱洗脱能力增强,表现为化合物保留时间缩短和峰拖尾减弱,但过强的洗脱又会导致分离度变差,因此,需要综合考虑各方影响因素以获得适合的分离条件。
手性对映体的分离是CO2超临界流体色谱的一个重要应用领域,快速高效、经济安全的特点和类型更为丰富的色谱柱配合将会成为手性拆分不可或缺的手段。
更多详情,请参见《超临界流体萃取/超临界流体色谱应用文集》