小A:艾思吉老师,又bug了,我进1.5ppm,也就是这个方法中标曲的最高点,图谱是这样的。
艾思吉:看样子是过载了,先降低进样量试试。
于是,小A从之前的5μL,尝试了2μL、1μL、0.5μL,直到使用0.5μL,过载现象才消失。
1.5ppm混标,进样量0.5μL:
小A:艾思吉老师,我进样量调到0.5uL才正常。
艾思吉:进样量相当于是原来的1/10。那您根据这个,调整下标曲的范围吧,原来的标曲是10ppb-1.5ppm,现在调整为1ppb-150ppb。先用150ppb试试是否过载,再用1ppb试一试灵敏度吧。
150ppb混标:
1ppb混标:
150ppb没有过载现象,峰形、分离度都不错;1ppb灵敏度也是可以的。
过 载 问 题 处 理 方 法 及 步 骤
1、先通过逐渐降低进样量的方式,大致确认峰饱和的最大浓度。
2、根据前面的实验,重新确认新的标曲范围。
3、确认新的标曲范围最高点是否过载,最低点灵敏度是否满足要求。
小A:艾思吉老师,但是现在仔细看1ppb的图,感觉第3个目标峰峰形不太好,拖尾很严重。
1ppb混标放大图:
艾思吉:嗯,确实。这种情况下考虑有可能是目标峰出峰的地方可能有干扰峰影响了目标峰的峰形。您进一个空白溶剂,再进一个空针排查下是否有干扰峰,这样同时可以排查下干扰峰来自哪里。
空白溶剂:
空针:
艾思吉:enn……进空针也有干扰峰。是不是因为使用了Co-injection进样功能导致的呀,这样,您进一针不使用Co-injection功能的空针看看。
不使用Co-injection功能的空针:
艾思吉:看来和Co-injection功能没有关系。enn……,你看啊,干扰峰主要出现在梯度洗脱程序的后半部分,后半部分流动性中甲醇比例比较大,是不是流动相甲醇纯度不高导致的。这样,您把流动相甲醇换个不同的品牌试试。
更换甲醇后空针:
更换甲醇后1ppb混标:
更换甲醇后1ppb混标放大图:
小A:哇塞,果然干扰峰少了很多,而且目标峰出峰位置的干扰没有了,最主要的是目标峰的峰形也恢复了正常。
排 查 干 扰 问 题 思 路
1、逐步排查干扰的来源:可通过进空白溶剂、空针等方式,如使用仪器上特殊的功能,可采取不使用此功能对比排查;另外,还可排查流动相,分别排查水相、有机相等。
2、确认干扰的来源后,通过优化此部分,降低或消除干扰。