小A:
艾思吉老师,求助求助!>.<
你看我做的这个峰形也太丑了吧,咋整?
艾思吉:
莫慌,莫慌。请详细说说。做的什么项目?样品溶剂是什么?初始流动相中有机相比例是什么?
小A:
我按照《化妆品安全技术规范》2022版征求意见稿中条件做的米诺地尔和坎利酮,这是10ppb混标的图,溶剂是90%乙腈水,初始流动相条件为5%有机相。
艾思吉:
那可能是溶剂效应吧。
小A:
溶剂效应?什么是溶剂效应?怎么引起的溶剂效应?
溶 剂 效 应
目前公认的对溶剂效应的理解是样品溶剂洗脱强度大于流动相洗脱强度时产生的色谱峰变形的现象。比如100%纯乙腈溶解样品,注入流动相为乙腈-水(18:82)的反相系统中,会造成色谱峰分叉或前延的现象。但是这种概念不能解释其他由于所选稀释剂导致的峰变形现象。所以我们将溶剂效应的概念延伸,溶剂效应,就是由于样品中某些组分在样品溶剂与流动相所处的状态的较大差异导致的色谱行为表现异常的情况。
艾思吉:
从你描述的情况(溶剂是90%乙腈水,初始流动相条件5%有机相)来看,样品溶剂的洗脱能力远远强于流动相洗脱能力,所以很可能是溶剂效应。
小A:
那我这个到底怎么处理呢?
艾思吉:
您试试将样品溶剂换成50%乙腈水。
小A:
哇,可以了,好厉害。
额,等等,那我的样品提取溶剂依然是90%乙腈水,提取后过滤膜直接进样的,如果换成50%乙腈水,是不是会影响提取效率呀。
艾思吉:
嗯,那这样的话,就不建议更换样品溶剂了。可以试试使用仪器上的Co-injection进样模式。
Co-injection 模 式
此模式相较传统直接进样(标准模式)可以在不改变样品溶剂条件下去除溶剂效应,改善峰型,提高定量灵敏度。尤其当样品溶液为高比例有机溶剂时,可以直接进样分析而无需担心溶剂效应。
小A:
哇塞,Co-injection模式进样果然有效。这个方法不错,不用改样品溶剂,只需要在软件上简单设置就行了。十分感谢,帮我解决了大问题了。
溶 剂 效 应 解 决 办 法
1. 用流动相做样品溶剂或降低样品溶剂的洗脱能力。
2. 使用仪器的在线稀释(Co-injection)功能。
3. 降低进样量。
4. 改变柱前管路规格:对于梯度洗脱而言,在不影响分离度的情况下,可以改用较粗内径的柱前管路。(注意:若是等度洗脱,此方法会降低柱效;若是梯度洗脱,基本不影响柱效)。