摘要:本文建立了酸枣仁中斯皮诺素的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱ShimNex CS C18分析酸枣仁中斯皮诺素,结果显示,斯皮诺素峰形对称,理论塔板数大于2000,斯皮诺素与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为酸枣仁中斯皮诺素的检测提供参考。
关键词:酸枣仁 斯皮诺素 ShimNex CS C18 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
色谱柱:ShimNex CS C18(5 μm,4.6×250mm;P/N:380-01230-01);
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器);
SHIMSEN Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341);
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 对照品溶液的制备
取斯皮诺素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含0.2mg的溶液,即得。
1.3 供试品溶液的制备
取本品粉末(过四号筛)约1g,精密称定,置索氏提取器中,加石油醚(60~90℃)适量,加热回流4小时,弃去石油醚液,药渣挥去溶剂,转移至锥形瓶中,加入70%乙醇20mL,加热回流2小时,滤过,滤渣用70%乙醇5mL洗涤,合并洗液与滤液,回收溶剂至干,残渣加甲醇溶解,转移至5mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:ShimNex CS C18(5 μm,4.6×250mm;P/N:380-01230-01)
柱温:25℃
检测波长:335 nm
流速:1.0 mL/min
进样量:10 µL
流动相:乙腈:A:水 B:乙腈
梯度程序如下:
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液和供试品色谱图如下:
对照品溶液
供试品溶液
重现性
对照品溶液重现性
供试品溶液重现性
3. 结论
本文建立了酸枣仁中斯皮诺素的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱ShimNex CS C18分析酸枣仁中斯皮诺素,结果显示,斯皮诺素峰形对称,理论塔板数大于2000,斯皮诺素与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为酸枣仁中斯皮诺素的检测提供参考。