摘要:本文建立了三七总皂苷指纹图谱的HPLC方法。参照新公示稿中色谱条件,采用色谱柱Shim-pack GISSC18建立三七总皂苷的指纹图谱,结果显示,三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷 Rb1、人参皂苷Rd峰形对称,人参皂苷Rg1与人参皂苷Re峰的分离度大于1.8,理论塔板数按人参皂苷Rg1计算大于6000,三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd与相邻杂质峰基线分离,满足新公示稿要求。此方法可为三七总皂苷指纹图谱的测定提供参考。
关键词:三七总皂苷 指纹图谱 Shim-pack GISS C18 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
色谱柱:Shim-pack GISS C18(5 μm,4.6×250mm;P/N:227-30061-07);
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器);
SHIMSEN Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341);
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 对照品溶液的制备
取人参皂苷Re对照品适量,精密称定,加70%甲醇制成每1 mL含0.2mg的溶液,即得。
1.3 供试品溶液的制备
取三七总皂苷对照提取物适量,精密称定,加70%甲醇溶解并稀释制成每1 mL含2.5mg的溶液,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:Shim-packGISSC18(5 μm,4.6×250mm;P/N:227-30061-07)
柱温:25℃
检测波长:203 nm
流速:1.3 mL/min
进样量:10 µL
流动相:乙腈:A:水 B:乙腈
梯度程序如下:
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液和参照物溶液色谱图如下:
对照品溶液
参照物溶液
重现性
对照品溶液重现性
参照物溶液重现性
3. 结论
本文建立了三七总皂苷指纹图谱的HPLC方法。参照新公示稿中色谱条件,采用色谱柱Shim-packGISSC18建立三七总皂苷的指纹图谱,结果显示,三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd峰形对称,人参皂苷Rg1与人参皂苷Re峰的分离度大于1.8,理论塔板数按人参皂苷Rg1计算大于6000,三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd与相邻杂质峰基线分离,满足新公示稿要求。此方法可为三七总皂苷指纹图谱的测定提供参考。