摘要:本文建立了槐花中芦丁的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱ShimNex CS C18分析槐花中芦丁,结果显示,芦丁峰形对称,理论塔板数大于2000,芦丁与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为槐花中芦丁的检测提供参考。
关键词:槐花芦丁 ShimNex CS C18 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
色谱柱:ShimNex CS C18(5 μm,4.6×250mm;P/N:380-01230-01);
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 对照品溶液的制备
取芦丁对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液,即得。
1.3 供试品溶液的制备
取本品细粉约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50mL,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率25kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液2mL,置于10mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:ShimNex CS C18(5 μm,4.6×250mm;P/N:380-01230-01)
柱温:40℃
检测波长:257 nm
流速:1.0 mL/min
进样量:10 µL
流动相:A:1%冰醋酸溶液;B:甲醇;A:B=68:32
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液和供试品溶液色谱图如下:
对照品溶液
供试品溶液
重现性
对照品溶液重现性
供试品溶液重现性
3. 结论
本文建立了槐花中芦丁的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱ShimNex CS C18分析槐花中芦丁,结果显示,芦丁峰形对称,理论塔板数大于2000,芦丁与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为槐花中芦丁的检测提供参考。