摘要:本文建立了4种脱氧核苷的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack Scepter C18分析4种脱氧核苷(脱氧鸟苷、脱氧腺苷、脱氧胸苷、脱氧胞苷),结果显示,4种化合物保留良好,峰型对称,且分离度达到1.5以上,此方法可为4种脱氧核苷分析提供参考。
关键词:脱氧核苷 Shim-pack Scepter C18 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-30AD 高效液相色谱仪;
色谱柱:Shim-packScepter C18(1.9μm,2.1×100mm;P/N:227-31012-05);
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱+取水器);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 混合标准溶液的制备:
分别取4种标准品适量,加水溶解并稀释至浓度分别为50μg/mL的混合溶液,备用。
1.3 分析条件
色谱柱:Shim-packScepter C18(1.9μm,2.1×100 mm;P/N:227-31012-05)
流速:0.2 mL/min
进样量:2 µL
柱温:35℃
检测器:260nm
流动相:A:10mM甲酸铵;B:甲醇
梯度程序如下:
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.3)进行采集,混合标准溶液色谱图如下:
重现性
3. 结论
本文建立了4种脱氧核苷的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-packScepter C18分析4种脱氧核苷(脱氧鸟苷、脱氧腺苷、脱氧胸苷、脱氧胞苷),结果显示,4种化合物保留良好,峰型对称,且分离度达到1.5以上,此方法可为4种脱氧核苷分析提供参考。