摘要：本文建立了注射用人生长激素检查项下相关蛋白的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件并进行优化，采用色谱柱ShimNex WP C4-S分析注射用人生长激素中相关蛋白，结果显示，人生长激素主峰保留时间在30-36分钟之间，人生长激素主峰与脱氨的人生长激素峰之间的分离度大于1.0，人生长激素主峰的拖尾因子在0.9-1.8之间，满足药典要求，此方法可为注射用人生长激素检查项下相关蛋白分析提供参考。
关键词：注射用人生长激素  相关蛋白  ShimNex WP C4-S  HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40D 高效液相色谱仪；
色谱柱：ShimNex WP C4-S（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01236-19）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱+取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 系统适用性溶液的制备：

取人生长激素对照品，加0.05 mol/L三羟甲基氨基甲烷缓冲液溶解并制成每1 mL中含2 mg的溶液，过滤除菌，室温放置24小时，作为系统适用性溶液。

1.3 分析条件

色谱柱：ShimNex WP C4-S（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01236-19）
流速：0.5 mL/min
进样量：20 µL
柱温：45℃
检测器：220nm
流动相：A：0.05 mol/L三羟甲基氨基甲烷缓冲液（用1mol/L盐酸调节pH值至7.5）；B：正丙醇
A：B=70.8：29.2

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，系统适用性溶液色谱图如下：

重现性

3. 结论

本文建立了注射用人生长激素检查项下相关蛋白的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件并进行优化，采用色谱柱ShimNex WP C4-S分析注射用人生长激素中相关蛋白，结果显示，人生长激素主峰保留时间在30-36分钟之间，人生长激素主峰与脱氨的人生长激素峰之间的分离度大于1.0，人生长激素主峰的拖尾因子在0.9-1.8之间，满足药典要求，此方法可为注射用人生长激素检查项下相关蛋白分析提供参考。