摘要:本文建立了益母草中盐酸水苏碱的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱ShimNex HE Amide分析益母草中的盐酸水苏碱,结果显示,盐酸水苏碱峰形对称,理论塔板数大于6000,盐酸水苏碱与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为益母草中盐酸水苏碱的检测提供参考。
关键词:益母草 盐酸水苏碱 ShimNex HE Amide HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
ShimadzuLC-40D XR高效液相色谱仪;
ELSD LT-Ⅲ蒸发光散射检测器;
色谱柱:ShimNex HE Amide(3μm,4.6×150 mm;P/N:380-01243-07);
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 对照品溶液的制备
取盐酸水苏碱对照品适量,精密称定,加70%乙醇制成每1 mL含0.5mg的溶液,即得。
1.3 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇25mL,称定重量,加热回流2小时,放冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:ShimNex HE Amide(3μm,4.6×150mm;P/N:380-01243-07)
流速:1.0 mL/min
进样量:10 µL
柱温:30℃
检测器:ELSD-LTⅢ,漂移管温度:50℃,增益:Wide,过滤器:4
流动相:A:0.2%冰醋酸溶液;B:乙腈
A:B=20:80
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液和供试品色谱图如下:
对照品溶液
供试品溶液
重现性
对照品溶液重现性
供试品溶液重现性
3. 结论
本文建立了益母草中盐酸水苏碱的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱ShimNex HE Amide分析益母草中的盐酸水苏碱,结果显示,盐酸水苏碱峰形对称,理论塔板数大于6000,盐酸水苏碱与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为益母草中盐酸水苏碱的检测提供参考。