烟酰胺单核苷酸、5-磷酸核糖、5-磷酸核糖-1-焦磷酸分析
SGLC-LC-364
摘要:本文建立了烟酰胺单核苷酸、5-磷酸核糖和5-磷酸核糖-1-焦磷酸3种化合物的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack Scepter C18-120、蒸发光散射检测器进行分析,3种化合物的分离度良好,峰形和重现性良好,满足检测需求。此方法可为烟酰胺单核苷酸、5-磷酸核糖和5-磷酸核糖-1-焦磷酸3种化合物分析提供参考。
关键词:烟酰胺单核苷酸 5-磷酸核糖 5-磷酸核糖-1-焦磷酸 Shim-pack Scepter C18-120 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-40DXR高效液相色谱仪;
ELSD LT-Ⅲ蒸发光散射检测器;
色谱柱:Shim-pack Scepter C18-120(3μm,4.6×150 mm;P/N:227-31016-05);
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 混合标准品溶液的制备
取烟酰胺单核苷酸、5-磷酸核糖、5-磷酸核糖-1-焦磷酸3种化合物适量,用水稀释制成各含100μg/mL的溶液,即得。
1.3 分析条件
色谱柱:Shim-pack Scepter C18-120(3μm,4.6×150 mm;P/N:227-31016-05)
流速:0.5 mL/min
进样量:10 µL
柱温:40℃
检测器:ELSD,漂移管温度:50℃,增益:Wide
流动相:0.1 MTEAA溶液(pH=7):甲醇=97:3
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.3)进行采集,混合标准品溶液色谱图如下:
混合标准品溶液
重现性
混合标准品溶液重现性
3. 结论
本文建立了烟酰胺单核苷酸、5-磷酸核糖、5-磷酸核糖-1-焦磷酸3种化合物的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack Scepter C18-120进行分析,3种化合物的分离度、峰形和重现性良好,满足检测需求。此方法可为烟酰胺单核苷酸、5-磷酸核糖、5-磷酸核糖-1-焦磷酸分析提供参考。