烟酰胺单核苷酸、烟酰胺、ATP等5种化合物的分析
SGLC-LC-352
摘要:本文建立了烟酰胺、烟酰胺单核苷酸、AMP、ADP、ATP等5种化合物的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack Scepter C18-120进行分析,5种化合物的分离度良好,峰形和重现性良好,满足检测需求。此方法可为烟酰胺、烟酰胺单核苷酸、AMP、ADP、ATP等5种化合物的分析提供参考。
关键词:烟酰胺单核苷酸 烟酰胺 AMP ADP ATP Shim-pack Scepter C18-120 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
色谱柱:Shim-pack Scepter C18-120(3μm,4.6×150 mm;P/N:227-31016-05);
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱+取水器);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 混合标准品溶液的制备
取ATP、ADP、AMP、烟酰胺、烟酰胺单核苷酸五种化合物适量,用流动相稀释制成各含100μg/mL的样品。
1.3 分析条件
色谱柱:Shim-pack Scepter C18-120(3μm,4.6×150 mm;P/N:227-31016-05)
柱温:40℃
检测器:PDA,254nm
流速:1.0 mL/min
进样量:5 µL
流动相:A:10mM四丁基氢氧化铵溶液于40mM磷酸二氢钾溶液(调节pH至6.2)B:甲醇. A:B=70:30
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.3)进行采集,混合标准品溶液色谱图如下:
混合标准品溶液:
混合标准品溶液重现性
3. 结论
本文建立了烟酰胺、烟酰胺单核苷酸、AMP、ADP、ATP 5种化合物的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack Scepter C18-120进行分析,5种化合物间分离度良好,峰形和重现性良好,满足检测需求。此方法可为烟酰胺、烟酰胺单核苷酸、AMP、ADP、ATP 5种化合物的分析提供参考。