摘要:本文建立了知母中知母皂苷BⅡ的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱Shim-pack Scepter C8分析知母中知母皂苷BⅡ,结果显示,知母皂苷BⅡ峰形对称,理论塔板数大于10000,知母皂苷BⅡ与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为知母中知母皂苷BⅡ的检测提供参考。
关键词:知母 知母皂苷BⅡ Shim-pack Scepter C8 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
色谱柱:Shim-pack Scepter C8-120(5 μm,4.6×250mm;P/N:227-31041-06);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 对照品溶液的制备
取知母皂甘BⅡ对照品适量,精密称定,加30%丙酮制成每1mL含0.50mg的溶液,即得。
1.3 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约0.15g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入30%丙酮25mL,称定重量,超声处理(功率400W ,频率40kHz)30分钟,取出,放冷,再称定重量,用30%丙酮补足减失的重量,摇匀。滤过,取续滤液,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:Shim-pack Scepter C8-120(5 μm,4.6×250mm;P/N:227-31041-06);
柱温:40℃
检测器:ELSD-LTⅢ蒸发光散射检测仪
流速:0.8mL/min
进样量:5 µL
流动相:乙腈:水=25:75
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液和供试品色谱图如下:
对照品溶液
供试品溶液
重现性
对照品溶液重现性
供试品溶液重现性
3. 结论
本文建立了知母中知母皂苷BⅡ的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱Shim-pack Scepter C8分析知母中知母皂苷BⅡ,结果显示,知母皂苷BⅡ峰形对称,理论塔板数大于10000,知母皂苷BⅡ与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为知母中知母皂苷BⅡ的检测提供参考。