摘要：本文建立了婴幼儿食品和乳品中胆碱的LC-MS/MS测定方法。参照国标GB 5413.20-2022中第三法色谱条件，采用色谱柱Shim-pack GIST Amide分析胆碱及其内标胆碱-d4，结果显示，胆碱及其内标胆碱-d4峰形对称，满足日常检测要求。此方法可为婴幼儿食品和乳品中胆碱的检测提供参考。
关键词：婴幼儿食品 乳品 胆碱 Shim-pack GIST Amide LC-MS/MS
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-30AD与LCMS-8050联用系统；
色谱柱：Shim-pack GIST Amide（3 μm，2.1×100 mm；P/N：227-30818-04）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 胆碱、胆碱-d4标准工作溶液的制备

准确称取胆碱-d4标准品适量，加10 mM甲酸铵溶液配制成每1 mL含1 mg的溶液，作为胆碱标准储备液；分别量取胆碱（100 µg/mL）和胆碱-d4标准储备液适量，加10 mM甲酸铵溶液制成每1 mL含胆碱和胆碱-d4分别为200 ng和50 ng的溶液，作为高浓度标准工作溶液；分别量取胆碱（100 µg/mL）和胆碱-d4标准储备液适量，加10 mM甲酸铵溶液制成每1 mL含胆碱和胆碱-d4分别为10 ng和50 ng的溶液，作为低浓度标准工作溶液；摇匀，备用。

1.3 分析条件

UHPLC条件
柱温：40℃
流速：0.3 mL/min （色谱柱出口连接3通，废液与检测器流路的分流比大约1：1）
进样量：2 µL
流动相： A：10 mM甲酸铵水溶液 B：乙腈

质谱条件
离子化模式：ESI，正离子扫描
碰撞气：氩气
雾化气：氮气 3 L/min
接口温度：300℃
加热模块温度：400 ℃
扫描模式：多反应监测(MRM)
加热气：干燥空气 10 L/min
干燥气：氮气 10 L/min
DL温度：250 ℃

各化合物MRM参数见下表：

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，标准工作溶液MRM色谱图如下：

标准工作溶液（胆碱浓度为200 ng/mL）

标准工作溶液（胆碱浓度为10 ng/mL）

重现性

标准工作溶液（胆碱浓度为10 ng/mL）重现性

3. 结论

本文建立了婴幼儿食品和乳品中胆碱的LC-MS/MS测定方法。参照国标GB 5413.20-2022中第三法色谱条件，采用色谱柱Shim-pack GIST Amide分析胆碱及其内标胆碱-d4，结果显示，胆碱及其内标胆碱-d4峰形对称，满足日常检测要求。此方法可为婴幼儿食品和乳品中胆碱的检测提供参考。