食品中维生素D的测定
SGLC-LC/MS-053
摘要:本文建立了维生素D2和维生素D3的LC-MS/MS测定方法。参照新国标《食品中维生素D的测定》征求意见稿中色谱条件,采用色谱柱ShimNex S-C18-PAH分析维生素D2和维生素D3及其内标,结果显示,4个化合物峰形对称,维生素D2和维生素D3达到基线分离,满足日常检测需求。此方法可为食品中维生素D2和D3的检测提供参考。
关键词:食品、维生素D2和维生素D3、ShimNex S-C18-PAH、LC-MS/MS
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-30AD与LCMS-8050联用系统;
色谱柱:ShimNex S-C18-PAH(3μm,2.1×100mm;P/N:380-01247-09);
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+60L水箱 +取水器);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE 针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC/MS 认证样品瓶 LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 混合对照品溶液的制备
1.2.1 单标溶液的配制:
分别称取维生素D2对照品和维生素D3对照品适量,加甲醇制成每1mL各含1mg的单标溶液。
1.2.2 混合对照品溶液的配制:
分别精密量取上述维生素D2和维生素D3单标溶液、VD2-d3内标溶液母液及VD3-d3内标溶液母液各单标溶液适量,用甲醇稀释制成混合对照品溶液,使得维生素D2的最终浓度为400ng/mL;维生素D3和VD2-d3内标溶液的最终浓度为200ng/mL;VD3-d3内标溶液的最终浓度为100ng/mL。
1.3 分析条件
UHPLC条件
色谱柱:ShimNex S-C18-PAH(3μm,2.1×100mm;P/N:380-01247-09);
柱温:35°C
流速:0.4mL/min
进样量:10µL
流动相:A:5mM甲酸铵水溶液+0.05%甲酸 B:5mM甲酸铵甲醇溶液+0.05%甲酸
质谱条件
离子化模式:ESI,正离子扫描
碰撞气:氩气
雾化气:氮气 3 L/min
接口温度:300℃
加热模块温度:400 ℃
扫描模式:多反应监测(MRM)
加热气:干燥空气 10 L/min
干燥气:氮气 10 L/min
DL温度:400 ℃
各化合物MRM参数见下表:
2 实验结果
按照上述色谱条件(1.3)进行采集,混合对照品溶液MRM色谱图如下::
混合对照品溶液:
重现性:
系统适用性溶液重现性
3. 结论
本文建立了维生素D2和维生素D3的LC-MS/MS测定方法。参照新国标《食品中维生素D的测定》征求意见稿中色谱条件,采用色谱柱ShimNex S-C18-PAH分析维生素D2和D3及其内标,结果显示,4个化合物峰形对称,维生素D2和维生素D3达到基线分离,满足日常检测需求。此方法可为食品中维生素D2和维生素D3的检测提供参考。