金钱草中槲皮素和山柰酚的测定
SGLC-LC-255
摘要:本文建立了金钱草中槲皮素和山柰酚的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱ShimNex CS C18分析金钱草中槲皮素和山柰酚,结果显示,槲皮素和山柰酚的峰形均对称,槲皮素峰的理论塔板数大于2500,槲皮素及山柰酚与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为金钱草中槲皮素和山柰酚的检测提供参考。
关键词:金钱草 槲皮素 山柰酚 ShimNex CS C18 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD 高效液相色谱仪;
色谱柱:ShimNex CS C18(5 μm,4.6×150 mm;P/N:380-01230-02);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 对照品溶液的制备
取槲皮素对照品、山柰酚对照品适量,精密称定,加80%甲醇制成每1 mL含槲皮素4 μg、山柰酚20 μg的溶液,即得。
1.3 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约1.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入80%甲醇50 mL,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用80%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液25 mL,精密加入盐酸5 mL,置90℃水浴中加热水解1小时,取出,迅速冷却,转移至50 mL量瓶中,用80%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:ShimNex CS C18(5 μm,4.6×150 mm;P/N:380-01230-02)
柱温:35℃
检测波长:360 nm
流速:1.0 mL/min
进样量:10 µL
流动相:甲醇:0.4%磷酸溶液=50:50
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液和供试品溶液色谱图如下:
对照品溶液
供试品溶液
重现性
对照品溶液重现性
供试品溶液重现性
3. 结论
本文建立了金钱草中槲皮素和山柰酚的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱ShimNex CS C18分析金钱草中的槲皮素和山柰酚,结果显示,槲皮素和山柰酚峰形均对称,其中槲皮素峰的理论塔板数大于2500,槲皮素及山柰酚与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为金钱草中槲皮素和山柰酚的检测提供参考。