摘要:本文建立了枸杞中甜菜碱的HPLC测定方法。结果表明,按照2020版《中国药典》中色谱条件,采用色谱柱ShimNex S-NH2-TMG分析枸杞中甜菜碱,甜菜碱峰形对称,理论塔板数大于3000,满足《中国药典》要求。此方法可为枸杞中甜菜碱的检测提供参考。
关键词:枸杞 甜菜碱 HPLC ShimNex S-NH2-TMG
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-40D高效液相色谱仪;
色谱柱:ShimNex S-NH2-TMG(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01247-03);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 样品溶液制备
取甜菜碱对照品适量,精密称定,加水制成每1 mL含0.17 mg的溶液,即得。
1.3 供试品溶液的制备
取本品粉碎,取约1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 mL,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液2 mL,置碱性氧化铝固相萃取小柱(2 g)上,用乙醇30 mL洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加水溶解,转移至2 mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:ShimNex S-NH2-TMG(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01247-03)
柱温:40 ℃
检测波长:195 nm
流速:1.0 mL/min
进样量:10 µL
流动相: 乙腈:水=85:15
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液和供试品溶液色谱图如下:
对照品溶液:
供试品溶液:
重现性
对照品溶液重现性
供试品溶液重现性
3. 结论
本文建立了枸杞中甜菜碱的HPLC测定方法。结果表明,按照2020版《中国药典》中色谱条件,采用色谱柱ShimNex S-NH2-TMG分析枸杞中甜菜碱,甜菜碱峰形对称,理论塔板数大于3000,满足《中国药典》要求。此方法可为枸杞中甜菜碱的检测提供参考。