摘要：本文建立了维生素B6含量测定系统适用性试验的HPLC测定方法。结果表明，按照《中国药典》中色谱分析条件，采用色谱柱Shim-pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm ) 和Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm）分析维生素B6，拖尾因子均在0.95~1.05之间，理论塔板数远高于药典要求的4000，能够满足《中国药典》需求，此方法可为维生素B6的检测提供参考。
关键词：维生素B6 Shim-pack GIS C18 Shim-pack VP-ODS HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD 高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm ，P/N：227-30106-08)；
色谱柱：Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm ，P/N：228-34937-92)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 对照品溶液的制备

取维生素B6适量，加流动相溶解并稀释制成每1 mL中约含0.01 mg的溶液，摇匀，作为对照溶液。

1.3 分析条件及实验结果

1.3.1 分析条件

色谱柱：Shim-pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm ，P/N：227-30106-08)；
流动相：0.04%戊烷磺酸钠溶液(用冰醋酸调节pH至3.0)：甲醇=85：15
柱温：40℃
检测波长：291 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 µL

实验结果

按照上述色谱条件（1.3.1）进行采集，对照品溶液色谱图如下：

重现性

1.3.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm ，P/N：228-34937-92)；
流动相：0.04%戊烷磺酸钠溶液(用冰醋酸调节pH至3.0)：甲醇=85：15
柱温：40℃
检测波长：291 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 µL

实验结果

按照上述色谱条件（1.3.2）进行采集，对照品溶液色谱图如下：

重现性

3. 结论

本文建立了维生素B6系统适用性试验的HPLC测定方法。结果表明，按照《中国药典》中色谱分析条件，采用色谱柱Shim-pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm ) 和Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm）分析维生素B6，拖尾因子分别为0.987与0.992，理论塔板数远高于药典要求的4000，能够满足《中国药典》需求，此方法可为维生素B6的检测提供参考。