摘要:本文建立了野菊花中蒙花苷的HPLC测定方法。结果表明,采用色谱柱Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm,5 μm )分析蒙花苷,蒙花苷峰的理论塔板数为3936,蒙花苷峰与相邻杂质峰能达到基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为野菊花中蒙花苷的检测提供参考。
关键词:野菊花 蒙花苷 Shim-pack VP-ODS HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
色谱柱Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm,5 μm;P/N 228-34937-92);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 分析条件
色谱柱:Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm,5 μm )
流动相:甲醇-水-冰醋酸(26:23:1)
柱温: 30℃
检测波长:334nm
流速:1.0 mL/min
进样量:20 μL
1.3 对照品溶液的制备
取蒙花苷对照品适量,精密称定,加甲醇(必要时加热)制成每1 mL含25μg的溶液,即得。
1.4 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约0.25 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇100 mL,称定重量,加热回流3小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
2. 结果及讨论
2.1 色谱图
按照上述色谱条件(1.2)进行采集,对照品溶液色谱图和样品色谱图如下:
蒙花苷对照品溶液:
供试品溶液:
3. 结论
参考《中国药典》中色谱条件,并对其条件进行优化,最终建立了野菊花中蒙花苷的HPLC测定方法。结果表明,采用色谱柱Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm,5 μm )分析蒙花苷,蒙花苷峰的理论塔板数为3936,蒙花苷峰与相邻杂质峰能达到基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为野菊花中蒙花苷的检测提供参考。