摘要:本文建立了桑叶中芦丁的HPLC测定方法。按照2020版《中国药典》中色谱条件,采用色谱柱ShimNex CS C18分析桑叶中芦丁,结果显示芦丁的峰形对称,理论塔板数大于5000,且与相邻杂质峰均能达到基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为桑叶中芦丁的含量测定提供参考。
关键词:桑叶 芦丁 ShimNex CS C18 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
色谱柱:ShimNex CS C18(5 μm,4.6×150 mm;P/N:380-01230-02);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 对照品溶液的制备
取芦丁对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液,即得。
1.3 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约1 g,精密称定,置圆底烧瓶中,加甲醇50 mL,加热回流30分钟,滤过,滤渣再用甲醇50 mL,同法提取2次,合并滤液,减压回收溶剂,残渣用甲醇溶解,转移至25 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:ShimNex CS C18(5 μm,4.6×150 mm;P/N:380-01230-02)
柱温:35 ℃
流速:1.5 ml/min
检测波长:358 nm
进样量:10 µL
流动相:A:甲醇;B:0.5%磷酸水
梯度程序如下:
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液和供试品溶液色谱图如下:
对照品溶液:
供试品溶液:
重现性
3. 结论
按照2020版《中国药典》中的色谱条件,建立了桑叶中芦丁的HPLC测定方法。采用色谱柱ShimNex CS C18分析桑叶中的芦丁,结果显示芦丁峰形对称,理论塔板数大于5000,且与相邻杂质峰均能达到基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为桑叶中芦丁的检测提供参考。