摘要：本研究建立了猪肉中5个α2-受体激动剂残留量的测定方法。参照国标GB 31660.6-2019，采用岛津的SHIMSEN Styra MCX产品对猪肉样品进行净化，Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离，岛津串联质谱LCMS-8050检测分析。对空白样品0.5 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，0.5 μg/kg加标浓度的加标回收率为69.63%-91.84%，RSD为2.67%-6.73%，回收率高，重现性好。该方法适用于猪肉中α2-受体激动剂残留量的测定。
关键词：SHIMSEN Styra MCX α2-受体激动剂 动物源性食品 LC-MSMS
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

仪器配置：Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统；
色谱柱：Shim-pack GIST C18，100×2.1 mm，2 μm (P/N：227-30001-04)；
固相萃取小柱：SHIMSEN Styra MCX 60 mg/3 mL (P/N：380-00853-01）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

UHPLC 条件
色谱柱：Shim-pack GIST C18，100×2.1 mm，2 μm (P/N：227-30001-04)
流速：0.3 mL/min
进样量：5 µL （CO-injection,15 μL 0.2%甲酸水）
柱温：30℃
流动相： A：0.2%FA水       B：乙腈
梯度洗脱程序如下：

质谱条件
离子化模式：ESI，正离子扫描
碰撞气：氩气
雾化气：氮气 3 L/min
接口温度：300℃
加热模块温度：400 ℃
扫描模式：多反应监测(MRM)
加热气：氮气 10 L/min
干燥气：氮气 10 L/min
DL温度：250 ℃

各化合物MRM参数见下表：

1.3 样品前处理
1.3.1 样品提取

取试料2 g（准确至±20mg），于50 mL离心管中，加碳酸钠缓冲液*5 mL，振荡混匀，加乙酸乙酯10 mL，充分振荡，于8000 r/min离心5 min，取上清液于鸡心瓶中，下层溶液中加乙酸乙酯10 mL重复提取一次，合并两次上清液。于40℃旋转蒸发至干，加初始流动相溶液4.0 mL溶解残余物，备用。样品提取流程图见下图1。

1.3.2 样品净化

SHIMSEN Styra MCX 60 mg/3 mL
3 mL甲醇、3 mL水活化，弃去流出液；待净化液上样，弃去流出液；3 mL水、3 mL甲醇水清洗，弃去流出液；6 mL 5%氨水甲醇洗脱，收集流出液；用5%氨水甲醇定容至6 mL，混匀，供LC-MS/MS分析。 净化流程图见图2。

2. 结果及讨论
2.1 标准品的MRM色谱图

2.2 猪肉中5种α2-受体激动剂的LC-MS/MS检测添加回收结果

将猪肉空白样品进行0.5 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：0.5 μg/kg加标浓度的加标回收率为69.63%-91.84%，RSD为2.67%-6.73%。

3. 结论

本研究建立了猪肉中5个α2-受体激动剂残留量的测定方法。参照国标GB 31660.6-2019，采用岛津的SHIMSEN Styra MCX产品对猪肉样品进行净化，Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离，岛津串联质谱LCMS-8050检测分析。对空白样品0.5 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，0.5 μg/kg加标浓度的加标回收率为69.63%-91.84%，RSD为2.67%-6.73%，回收率高，重现性好。该方法适用于猪肉中α2-受体激动剂残留量的测定。