摘要：本文建立了克痤隐酮凝胶中丹参酮ⅡA和隐丹参酮的HPLC测定方法。结果表明，按照国家药品标准YBZ13602004-2009Z中色谱条件，采用色谱柱Shim-pack GWS C18分析克痤隐酮凝胶中丹参酮ⅡA和隐丹参酮，丹参酮ⅡA和隐丹参酮的峰形对称，理论塔板数大于2000，且与相邻杂质峰能达到基线分离，满足国家药品标准YBZ13602004-2009Z要求。此方法可为克痤隐酮凝胶中丹参酮ⅡA和隐丹参酮的检测提供参考。
关键词：克痤隐酮凝胶 丹参酮ⅡA 隐丹参酮 Shim-pack GWS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20A高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GWS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30158-03；S/N：18F05888）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 对照品溶液的制备

取丹参酮ⅡA对照品10 mg，隐丹参酮对照品10 mg，精密称定，置100 mL棕色量瓶中，用甲醇超声使溶解，并稀释至刻度，摇匀，再精密量取5 mL，置10 mL棕色量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

1.3 供试品溶液的制备

取本品5 g，精密称定，加层析用硅胶（100～200目）10 g，拌匀，用乙醚湿法装入色谱柱（内径2.5 cm）上，用乙醚洗脱至色谱柱无色为止，收集乙醚洗脱液，挥干，残渣加甲醇使溶解，定量转移至10 mL棕色量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

1.4 分析条件

色谱柱：Shim-pack GWS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30158-03；S/N：18F05888）
流速：1.0 mL/min
进样量：10μL
柱温：25 ℃
检测器：254 nm
流动相： 甲醇：水=85：15

2. 结果及讨论

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：
对照品溶液：

供试品溶液：

重现性
对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

3. 结论

按照国家药品标准YBZ13602004-2009Z中色谱条件，建立了克痤隐酮凝胶中丹参酮ⅡA和隐丹参酮的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack GWS C18分析克痤隐酮凝胶中丹参酮ⅡA和隐丹参酮，丹参酮ⅡA和隐丹参酮的峰形对称，理论塔板数大于2000，且与相邻杂质峰能达到基线分离，满足国家药品标准YBZ13602004-2009Z要求。此方法可为克痤隐酮凝胶中丹参酮ⅡA和隐丹参酮的检测提供参考。