摘要:本应用建立了奶粉中三聚氰胺的测定方法。采用岛津SHIMSEN Styra MCX产品对样品进行净化,Shim-pack Scepter C18-120色谱柱进行分离,岛津HPLC检测分析。对空白样品进行2.5 mg/kg浓度加标后,按照上述前处理方法处理后上机,平行3份样品考察回收率和RSD,结果显示:2.5 mg/kg加标浓度的平均回收率为89.06%,RSD为2.48%。该方法操作简单、回收率高、重现性好,适用于奶粉中三聚氰胺的测定。
关键词:SHIMSEN Styra MCX 三聚氰胺 奶粉 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
仪器配置:岛津高效液相色谱仪LC-20AD;
色谱柱:Shim-pack Scepter C18-120(250×4.6 mm,5 μm ,P/N:227-31020-06);
固相萃取小柱:SHIMSEN Styra MCX 60 mg/3 mL (P/N:380-00853-01)
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 分析条件
色谱柱:Shim-pack Scepter C18-120(250×4.6 mm,5 μm ,P/N:227-31020-06);
流速:1.0 mL/min
进样量:20 μL
柱温:40 ℃
流动相:A:离子对试剂缓冲液(准确称取2.10 g柠檬酸和2.16 g辛烷磺酸钠,加水约980 mL溶解,用氢氧化钠调节pH至3.0,加水定容至1L。)
B:乙腈
A:B=91:9
1.3 样品前处理
1.3.1 样品准备
精密称取样品2 g于50 mL离心管中,加15 mL 1%三氯乙酸溶液和5 mL乙腈,涡旋1 min,超声10 min,8000 r/min离心2 min,取出上清液于量瓶中,用1%三氯乙酸定容至25 mL,移取5 mL提取液,加5 mL水,混匀,待净化。流程图见图1。
1.3.2 样品净化
SHIMSEN Styra MCX 60 mg/3 mL
3 mL甲醇、3 mL水活化,弃去流出液;待净化液上样,弃去流出液;3 mL水、3 mL甲醇清洗,弃去流出液;5 mL 5%氨水甲醇洗脱,收集流出液;将收集的洗脱液于50℃氮吹至干,加流动相(A:B=91:9)1 mL,涡旋混匀,过0.22 μm PTFE微孔滤膜,供HPLC分析。流程图见下图2。
2. 结果及讨论
2.1 色谱图
三聚氰胺标准品溶液液相色谱图(1.0 μg/mL)
奶粉中三聚氰胺(空白样品)液相色谱图
奶粉中三聚氰胺(加标样品:添加浓度为2.5 mg/kg)液相色谱图
2.2 奶粉中三聚氰胺的HPLC检测添加回收结果
将奶粉空白样品进行2.5 mg/kg浓度加标后,按照上述前处理方法处理后上机,平行3份样品考察回收率和RSD,具体结果如下:2.5 mg/kg加标浓度的平均回收率为89.06%,RSD为2.48%。
3. 结论
本应用建立了奶粉中三聚氰胺的测定方法。采用岛津SHIMSEN Styra MCX产品对样品进行净化,Shim-pack Scepter C18-120色谱柱进行分离,岛津HPLC检测分析。对空白样品进行2.5 mg/kg浓度加标后,按照上述前处理方法处理后上机,平行3份样品考察回收率和RSD,结果显示:2.5 mg/kg加标浓度的平均回收率为2.5 mg/kg加标浓度的平均回收率为89.06%,RSD为2.48%。该方法操作简单、回收率高、重现性好,适用于奶粉中三聚氰胺的测定。