摘要：建立了鸡肉中金刚烷胺的测定方法。采用岛津的SHIMSEN QuEChERS产品对鸡肉样品进行净化，Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离，串联质谱检测分析。对空白样品2.0 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，2.0 μg/kg加标浓度的加标回收率为74.53%-85.02%，RSD为7.39%，回收率高，重现性好。该方法适用于鸡肉中金刚烷胺的测定。
关键词：喹乙醇代谢物 猪肉 WondaSep MAX LC-MSMS
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

仪器配置：Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统；
色谱柱：Shim-pack GIST C18，50×2.1 mm，2 μ（P/N：227-30001-02）；
固相萃取小柱：WondaSep MAX 60 mg/3mL（P/N：5010-81941）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

      UHPLC 条件

色谱柱：Shim-pack GIST C18，50×2.1 mm，2 μm (P/N：227-30001-02)
流 速：0.4 mL/min
进样量：5 μL
柱 温：40 ℃
流动相： A：0.1%甲酸水      B：乙腈

梯度洗脱程序如下：

质谱条件

3-甲基喹噁啉-2-羧酸MRM参数见下表

1.3 样品前处理

1.3.1样品提取

称取2.0 g猪肉样品于50 mL离心管中，加入10 mL 0.6%甲酸水溶液，手动振摇混匀1 min，置于50℃振荡1 h，加入3 mL 1.0 mol/L的Tris碱溶液，混匀，加入3 mL 0.01g/mL蛋白酶水溶液，充分混匀，置于50℃振荡16 h，加入17 mL 0.3 mol/L盐酸溶液，超声10 min，8000 r/min离心5 min，取15 mL上清液待净化。流程图见下图1。

1.3.2 样品净化

       WondaSep MAX 60 mg/3 mL

3 mL甲醇、3 mL水活化，弃去流出液；15 mL待净化液上样，弃去流出液；5 mL水、3 mL甲醇清洗，弃去流出液；3 mL 2%甲酸乙酸乙酯洗脱，收集流出液；35℃氮吹至干，加70%甲醇水定容至1 mL，过0.22 μm微孔滤膜，供LC-MS/MS分析。流程图见下图2。

1.4 标准曲线的绘制

取空白样品，按上述1.3.1和1.3.2处理，使用空白基质配制浓度分别为0.1 μg/L、0.2 μg/L、0.5 μg/L、1 μg/L、5 μg/L、10μg/L、50 μg/L和100 μg/L的标准样品。

2. 结果及讨论

2.1 标准品的MRM色谱图

2.2 线性范围

取空白溶液配制混合工作液，得到0.1 μg/L、0.2 μg/L、1 μg/L、5 μg/L、10μg/L、50 μg/L和100 μg/L不同浓度的样品，按1.2中的分析条件进行测定，外标法定量。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，如图2所示。线性方程、相关系数、线性范围见表1。

2.3 猪肉中3-甲基喹噁啉-2-羧酸的LC-MS/MS检测添加回收结果

将猪肉空白样品进行0.5 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行4份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：加标回收率为78.80%-83.74%，RSD为2.48%。

3. 结论

综上，本方案采用岛津的WondaSep MAX固相萃取小柱对猪肉样品进行净化，Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离，采用岛津串联质谱LCMS-8050检测分析，建立了猪肉样品中喹乙醇代谢物3-甲基喹噁啉-2-羧酸的检测方法，该方法回收率高、重现性好，适用于猪肉样品中喹乙醇代谢物3-甲基喹噁啉-2-羧酸的测定。