摘要：本应用建立了蜂蜜和食醋中阿维菌素、埃普利诺菌素、伊维菌素、多拉菌素药物残留的测定方法。采用岛津的SHIMSEN QuEChERS产品对样品进行净化，Shim-pack GIST色谱柱进行分离，岛津串联质谱LCMS-8050检测分析。对空白样品进行5.0 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示：蜂蜜5.0 μg/kg加标浓度的平均回收率为94.96%-113.90%，RSD为2.05%-7.93%；食醋5.0 μg/kgL加标浓度的平均回收率为83.45%-100.40%，RSD为1.70%-11.14%。该方法操作简单、快速、回收率高，重现性好，适用于蜂蜜和食醋样品中阿维菌素类药物残留的测定。
关键词：QuEChERS 阿维菌素 蜂蜜 食醋 LC-MS/MS
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

仪器配置：Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统；
色谱柱：Shim-pack GIST C18，50×2.1 mm，2 μm (P/N：227-30001-02)；
SHIMSEN QuEChERS多兽残专用提取包（QuEChERS Extract Tubes for Vet Drugs In Foods；P/N 380-00155）；
SHIMSEN QuEChERS多兽残专用净化包（QuEChERS Dispersive Tubes for Vet Drugs In Foods；P/N 380-00147）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

      UHPLC 条件

色谱柱：Shim-pack GIST C18，50×2.1 mm，2 μm (P/N：227-30001-02)
流 速：0.3 mL/min
进样量：5 μL
柱 温：40 ℃
流动相：A：5 mM乙酸铵溶液 B：乙腈

梯度洗脱程序如下：

质谱条件

       离子化模式：ESI，负离子扫描

       碰撞气：氩气

       雾化气：氮气 3 L/min

       接口温度： 300℃

       加热模块温度：400 ℃
 

       扫描模式：多反应监测(MRM)

       加热气：氮气 10 L/min

       干燥气：氮气 10 L/min

       DL温度：250 ℃

各化合物MRM参数见下表

1.3 样品前处理

1.3.1蜂蜜前处理

精密称取蜂蜜样品5.0 g，加10 mL 水，手动振摇30 s，加10 mL乙腈，手动振摇30 s，加入SHIMSEN QuEChERS多兽残专用提取包（380-00155，QuEChERS Extract Tubes for Vet Drugs In Foods 50/p），手动振摇30 s，6000 rpm离心2 min，取 2 mL上清液转移至SHIMSEN QuEChERS多兽残专用净化包（380-00147，QuEChERS Dispersive Tubes for Vet Drugs In Foods 100/p）中，手动振摇30 s，6000 rpm离心2 min，取上清液过0.22 μm微孔滤膜，进LC-MS/MS分析。流程图见下图1。

1.3.2 食醋前处理

精密称取食醋样品5.0 g，加5 mL 水，手动振摇30 s，加10 mL乙腈，手动振摇30 s，加入SHIMSEN QuEChERS多兽残专用提取包（380-00155，QuEChERS Extract Tubes for Vet Drugs In Foods 50/p），手动振摇30 s，6000 rpm离心2 min，取 2 mL上清液转移至SHIMSEN QuEChERS多兽残专用净化包（380-00147，QuEChERS Dispersive Tubes for Vet Drugs In Foods 100/p）中，手动振摇30 s，6000 rpm离心2 min，取上清液过0.22 μm微孔滤膜，进LC-MS/MS分析。流程图见下图2。

2. 结果及讨论

2.1 标准品的MRM色谱图

2.2 蜂蜜和食醋中阿维菌素类药物残留的LC-MS/MS检测添加回收结果

将蜂蜜和食醋空白样品分别进行5.0 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：蜂蜜5.0 μg/kg加标浓度的平均回收率为94.96%-113.90%，RSD为2.05%-7.93%；食醋5.0 μg/kg加标浓度的平均回收率为83.45%-100.40%，RSD为1.70%-11.14%。

3. 结论

采用岛津的InertSep HLB产品对自来水样品进行净化富集，Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离，串联质谱LCMS-8050检测分析。对空白样品进行2.0 ng/L 和20.0 ng/L浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：2.0 ng/L加标浓度的加标回收率为61.4%-115.5%，RSD为2.19%-16.60%；20.0 ng/L加标浓度的加标回收率为61.20%-115.8%，RSD为1.58%-13.07%，回收率高，重现性好。该方法适用于水中喹诺酮类、磺胺类、硝唑类、大环内酯类和氯霉素类等抗生素残留的同时测定。