摘要：本方案建立了鸡蛋中氟虫腈及其代谢物（氟虫腈砜、氟虫腈硫醚、氟甲腈）同时测定的方法。采用岛津的InertSep HLB产品对鸡蛋样品进行净化，Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离，串联质谱检测分析。对空白样5.0 μg/kg 和20.0 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，20.0 μg/kg加标浓度的加标回收率为98.36%-106.42%，RSD为0.78%-3.41%；5.0 μg/kg加标浓度的加标回收率为100.41%-109.087%，RSD为0.55%-3.51%。该方法操作简单，回收率高，重现性好。该方法适用于鸡蛋等动物源性样品中的氟虫腈、氟虫腈砜、氟虫腈硫醚、氟甲腈的同时测定。
关键词：InertSep HLB 鸡蛋 氟虫腈 LC-MSMS
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

仪器配置：Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统；
色谱柱：Shim-pack GIST C18，50×2.1 mm，2 μm (P/N：227-30001-02)；
固相萃取小柱：InertSep HLB 60 mg/3 mL (P/N：5010-81973) ；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

      UHPLC 条件

色谱柱：Shim-pack GIST C18，50×2.1 mm，2 μm (P/N：227-30001-02)
流 速：0.4 mL/min
进样量：0.2 μL
柱 温：40 ℃
流动相： A：1 mM乙酸铵 B：甲醇

梯度洗脱程序如下：

质谱条件

       离子化模式：ESI，负离子扫描 扫描模式：多反应监测(MRM)

       碰撞气：氩气 加热气：氮气 10 L/min

       雾化气：氮气 3 L/min 干燥气：氮气 10 L/min

       接口温度： 300℃ DL温度：250 ℃

       加热模块温度：400 ℃

各化合物MRM参数见下表

1.3 样品前处理

1.3.1样品提取

称取样品2.0 g，加2 mL水，涡旋混匀，加5 mL乙腈，涡旋混匀，加2 g氯化钠，手动振摇1 min，8000 rpm离心2 min，取 1mL上清液，加10 mL水混匀待净化。流程图见下图1。

1.3.2 样品净化

       InertSep HLB 60 mg/3 mL

3 mL甲醇、3 mL水活化，弃去流出液；待净化液上样，弃去流出液；2 mL水、2 mL 5%甲醇水淋洗，弃去流出液；减压抽干小柱5 min；2 mL乙腈洗脱，收集流出液；将洗脱液用乙腈定容至2 mL，涡旋混匀，过0.22 μm微孔滤膜，供LC-MS/MS分析。 流程图见图2。

2. 结果及讨论

2.1 标准品的MRM色谱图

2.2 鸡蛋中氟虫腈及其代谢物的LC-MS/MS检测添加回收结果

将空白样品进行20.0 μg/kg 和5.0 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：20.0 μg/kg加标浓度的加标回收率为98.36%-106.42%，RSD为0.78%-3.41%；5.0 μg/kg加标浓度的加标回收率为100.41%-109.087%，RSD为0.55%-3.51%。

3. 结论

本方案建立了鸡蛋中氟虫腈及其代谢物（氟虫腈砜、氟虫腈硫醚、氟甲腈）同时测定的方法。采用岛津的InertSep HLB产品对鸡蛋样品进行净化，Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离，串联质谱检测分析。对空白样5.0 μg/kg 和20.0 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，20.0 μg/kg加标浓度的加标回收率为98.36%-106.42%，RSD为0.78%-3.41%；5.0 μg/kg加标浓度的加标回收率为100.41%-109.087%，RSD为0.55%-3.51%。该方法操作简单，回收率高，重现性好。该方法适用于鸡蛋等动物源性样品中的氟虫腈、氟虫腈砜、氟虫腈硫醚、氟甲腈的同时测定。