鸡肉中金刚烷胺的测定
SGLC-LC/MS-012
摘要:建立了鸡肉中金刚烷胺的测定方法。采用岛津的WondaSep MCX固相萃取小柱对鸡肉样品进行净化,Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离,串联质谱检测分析。对空白样品2.0 μg/kg浓度加标后,按照上述前处理方法处理后上机,平行5份样品考察回收率和RSD,结果显示,2.0 μg/kg加标浓度的加标回收率为84.19%-87.67%,RSD为1.55%,回收率高,重现性好。该方法适用于鸡肉中金刚烷胺的测定。
关键词:金刚烷胺 鸡肉 WondaSep MCX Shim-pack GIST C18 LC-MSMS
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
仪器配置:Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统;
色谱柱:Shim-pack GIST C18,50×2.1 mm,2 μm (P/N:227-30001-02);
固相萃取小柱:WondaSep MCX 60 mg/3mL
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 分析条件
UHPLC 条件
色谱柱:Shim-pack GIST C18,50×2.1 mm,2 μm (P/N:227-30001-02)
流 速:0.4 mL/min
进样量:5 μL
柱 温:40 ℃
流动相: A:0.1%甲酸水 B:乙腈
梯度洗脱程序如下:
质谱条件
金刚烷胺MRM参数见下表
1.3 样品前处理
1.3.1样品提取
称取1.0 g鸡肉样品于50 mL离心管中,加10 mL 甲醇-1%三氯乙酸(1:1),手动振摇1 min,8000 r/min离心2 min,取5 mL上清液待净化。
1.3.2 样品净化
WondaSep MCX 60 mg/3 mL
3 mL甲醇、3 mL 2 mol/L盐酸水溶液活化,弃去流出液;5 mL待净化液上样,弃去流出液;2.5 mL 2 mol/L盐酸水溶液、2.5 mL70%甲醇水清洗,弃去流出液;3 mL10%氨水甲醇洗脱,收集流出液;向洗脱液中加水定容至5 mL,过0.22 μm微孔滤膜,供LC-MS/MS分析。流程图见下图1。
1.4 标准曲线的绘制
取空白样品,按上述1.3.1和1.3.2处理,使用空白基质配制浓度分别为0.1 μg/L、0.2 μg/L、1 μg/L、5 μg/L、10μg/L、50 μg/L和100 μg/L的标准样品。
2. 结果及讨论
2.1 标准品的MRM色谱图
2.2 线性范围
取空白溶液配制混合工作液,得到0.1 μg/L、0.2 μg/L、1 μg/L、5 μg/L、10μg/L、50 μg/L和100 μg/L不同浓度的样品,按1.2中的分析条件进行测定,外标法定量。以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,如图2所示。线性方程、相关系数、线性范围见表1。
2.3 鸡肉中金刚烷胺的LC-MS/MS检测添加回收结果
将鸡肉空白样品进行2.0 μg/kg浓度加标后,按照上述前处理方法处理后上机,平行5份样品考察回收率和RSD,具体结果如下:加标回收率为84.19%-87.67%,RSD为1.55%。
3. 结论
综上,本方案采用岛津的WondaSep MCX固相萃取小柱对鸡肉样品进行净化,Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离,采用岛津串联质谱LCMS-8050检测分析,建立了鸡肉样品中金刚烷胺的检测方法,该方法回收率高、重现性好,适用于鸡肉样品中金刚烷胺的测定。