摘要：本文建立了威灵仙中齐墩果酸的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-Pack GIS C18-P (4.6×250 mm，5 μm )分析齐墩果酸，齐墩果酸峰的理论塔板数为9237，齐墩果酸峰与相邻杂质峰能达到基线分离，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为威灵仙中齐墩果酸的检测提供参考。
关键词：威灵仙 齐墩果酸 Shim-Pack GIS C18-P HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱Shim-Pack GIS C18-P (4.6×250 mm，5 μm；P/N 227-30557-07 )；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-Pack GIS C18-P (4.6×250 mm，5 μm )
流动相：乙腈-水（90：10）
柱温：30℃
检测波长：205 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 μL

1.3 对照品溶液的制备

取齐墩果酸对照品适量，精密称定，加甲酵制成每l mL含l mg的溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品粉末（过四号筛)约4 g，精密称定，置索氏提取器中，加乙酸乙酯适量，加热回流3小时，弃去乙酸乙酯液，药渣挥干溶剂，连同滤纸筒转移至锥形瓶中，精密加入稀乙醇50 mL，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25 mL，置水浴上蒸干，残渣加2 mol/L盐酸溶液30 mL使溶解，加热回流2小时。立即冷却，移入分液漏斗中，用水10 mL分次洗涤容器，洗液并入分液漏斗中。加乙酸乙酯振摇提取3次，每次15 mL，合并乙酸乙酯液，70°C以下浓缩至近干，加甲醇溶解，转移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
注：对照品浓度和供试品浓度为药典规定浓度的十分之一。

2. 结果及讨论

2.1 色谱图

按照上述色谱条件（1.2）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：
齐墩果酸对照品溶液：

供试品溶液：

2.2 标准曲线、重现性

配制一系列浓度的标准溶液。上述实验条件（1.2）进行采集。各组分标准曲线和重现性结果如下所示。
齐墩果酸标准曲线：齐墩果酸的重复性：

3. 结论

参考《中国药典》中色谱条件，并对其条件进行优化，最终建立了威灵仙中齐墩果酸的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-Pack GIS C18-P (4.6×250 mm，5 μm )分析齐墩果酸，齐墩果酸峰的理论塔板数为9237，齐墩果酸峰与相邻杂质峰能达到基线分离，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为威灵仙中齐墩果酸的检测提供参考。