摘要:本文建立了女贞子中特女贞苷的HPLC测定方法。结果表明,采用色谱柱Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm)分析特女贞苷,特女贞苷峰的理论塔板数为6241,特女贞苷峰与相邻杂质峰能达到基线分离,且重复性良好,满足《中国药典》要求。此方法可为女贞子中特女贞苷的检测提供参考。
关键词:女贞子 特女贞苷 Shim-pack GISS C18 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
色谱柱:Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm;P/N:227-30061-07);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 分析条件
色谱柱:Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm )
流动相:甲醇-水(40:60)
柱温:40 ℃
检测波长:224 nm
流速:1.0 mL/min
进样量:5 μL(对照品);10 μL(供试品)
1.3 对照品溶液的制备
对照品溶液的制备取特女贞苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每l mL含0.25 mg的溶液,即得。
1.4 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇50 mL,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
2. 结果及讨论
2.1 色谱图
按照上述色谱条件(1.2)进行采集,对照品溶液色谱图和样品色谱图如下:
阿魏酸对照品溶液:
供试品溶液:
2.2 标准曲线、重现性
上述实验条件(1.2)进行采集。重现性结果如下所示。
特女贞苷的重复性:
3. 结论
参考《中国药典》中色谱条件,并对其条件进行优化,最终建立了女贞子中特女贞苷的HPLC测定方法。结果表明,采用色谱柱Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm)分析特女贞苷,特女贞苷峰的理论塔板数为6241,特女贞苷峰与相邻杂质峰能达到基线分离,且重复性良好,满足《中国药典》要求。此方法可为女贞子中特女贞苷的检测提供参考。