摘要：本研究建立了自来水中44个抗生素残留同时测定的方法。采用岛津的InertSep HLB产品对自来水样品进行净化富集，Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离，串联质谱LCMS-8050检测分析。对空白样品进行2.0 ng/L 和20.0 ng/L浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：2.0 ng/L加标浓度的加标回收率为61.4%-115.5%，RSD为2.19%-16.60%；20.0 ng/L加标浓度的加标回收率为61.20%-115.8%，RSD为1.58%-13.07%，回收率高，重现性好。该方法适用于水中喹诺酮类、磺胺类、硝唑类、大环内酯类和氯霉素类等抗生素残留的同时测定。
关键词：InertSep HLB 抗生素 自来水 LC-MSMS
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

仪器配置：Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统；
色谱柱：Shim-pack GIST C18，100×2.1 mm，2 μm (P/N：227-30001-04)；
固相萃取小柱：InertSep HLB 200 mg/6mL (P/N：5010-81976）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

UHPLC 条件

Shim-pack GIST C18，100×2.1 mm，2 μm (P/N：227-30001-04)
流 速：0.3 mL/min
进样量：5 μL
柱 温：40 ℃
流动相：A：0.1%甲酸水 B：甲醇

梯度洗脱程序如下：

质谱条件

离子化模式：ESI，正离子扫描

碰撞气：氩气

雾化气：氮气 3 L/min

接口温度： 300℃

加热模块温度：400 ℃
 

扫描模式：多反应监测(MRM)

加热气：氮气 10 L/min

干燥气：氮气 10 L/min

DL温度：250 ℃

各化合物MRM参数见下表

1.3 样品前处理

1.3.1样品准备

精密量取样品500 mL于烧杯中，加1.0 g Na2EDTA，超声溶解，盐酸调pH至4.0，待净化。

1.3.2 样品净化

InertSep HLB 500 mg/6 mL

5 mL甲醇、5 mL水活化，弃去流出液；待净化液以5-7 mL/min的流速上样，弃去流出液；6 mL水以5-7 mL/min的流速清洗，弃去流出液；减压抽干小柱10 min；5 mL甲醇-乙酸乙酯（50：50）以1-2 mL/min的流速洗脱，收集流出液；将收集的洗脱液于35℃下氮吹至1 mL以下，用20%甲醇水溶液定容至1 mL，涡旋混匀，过0.22 μm微孔滤膜，供LC-MS/MS分析。 流程图见图1。

2. 结果及讨论

2.1 标准品的MRM色谱图

2.2 自来水中44种抗生素的LC-MS/MS检测添加回收结果

将空白样品进行2.0 ng/L 和20.0 ng/L浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：2.0 ng/L加标浓度的加标回收率为61.4%-115.5%，RSD为2.19%-16.60%；20.0 ng/L加标浓度的加标回收率为61.20%-115.8%，RSD为1.58%-13.07%。

3. 结论

采用岛津的InertSep HLB产品对自来水样品进行净化富集，Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离，串联质谱LCMS-8050检测分析。对空白样品进行2.0 ng/L 和20.0 ng/L浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：2.0 ng/L加标浓度的加标回收率为61.4%-115.5%，RSD为2.19%-16.60%；20.0 ng/L加标浓度的加标回收率为61.20%-115.8%，RSD为1.58%-13.07%，回收率高，重现性好。该方法适用于水中喹诺酮类、磺胺类、硝唑类、大环内酯类和氯霉素类等抗生素残留的同时测定。