摘要：本文建立了硝磺草酮原药的HPLC测定方法。参照GB 29382—2012硝磺草酮的色谱条件，采用色谱柱Shim pack GIST C18（4.6×250mm，5μm）、Shim-pack Scepter C18（4.6×250mm，5μm）、Shim-pack Scepter HD-C18（4.6×250mm，5μm），对硝磺草酮原药供试品、硝磺草酮对照品进行分析，结果显示硝磺草酮峰形对称，且结果重现性较好，满足GB 29382—2012要求。此方法可为硝磺草酮原药的含量测定提供参考。
关键词：硝磺草酮 Shim-pack GIST C18 Shim-pack Scepter C18 Shim-pack Scepter HD-C18 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-30A高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GIST C18（5μm，4.6×250 mm；P/N：227-30017-08；S/N：18K07996）；
Shim-pack Scepter C18（5μm，4.6×250 mm；P/N：227-31020-06；S/N：130XA80089）；
Shim-pack Scepter HD-C18（5μm，4.6×250 mm；P/N：227-31024-06；S/N：119ZA80037）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。
1.2 溶液的制备
1.2.1 对照品溶液的制备
称取0.1g（精确至0.0002g）硝磺草酮标样于50 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，超声波振荡5 min使试样溶解，冷却至室温，摇匀。用移液管移取上述溶液5 mL于50 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。
1.2.2 供试品溶液的制备
称取含硝磺草酮0.1g（精确至0.0002 g）的已干燥过的试样于50 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，超声波振荡5 min使试样溶解，冷却至室温，摇匀。用移液管移取上述溶液5 mL于50 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。
1.3 分析条件及实验结果
1.3.1 分析条件
Shim-pack GIST C18（5μm，4.6×250 mm，P/N：227-30017-08，S/N：18K07996）
柱温： 30℃
检测波长：270 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：5μL
流动相：乙腈：水（磷酸调pH至3.0）=40：60
实验结果
按照上述色谱条件（1.3.1）进行采集，系统适用性溶液色谱图如下：
对照品溶液：
重现性：
供试品溶液:
重现性：
1.3.2 分析条件
Shim-pack Scepter C18（5μm，4.6×250 mm，P/N：227-31020-06，S/N：130XA80089）
柱温： 30℃
检测波长：270 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：5μL
流动相：乙腈：水（磷酸调pH至3.0）=40：60
实验结果
按照上述色谱条件（1.3.2）进行采集，系统适用性溶液色谱图如下：
对照品溶液：
重现性：
供试品溶液:
重现性：
1.3.3 分析条件
Shim-pack Scepter HD-C18（5μm，4.6×250 mm，P/N：227-31024-06，S/N：119ZA80037）
柱温： 30℃
检测波长：270 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：5μL
流动相：乙腈：水（磷酸调pH至3.0）=40：60
实验结果
按照上述色谱条件（1.3.3）进行采集，系统适用性溶液色谱图如下：
对照品溶液：
重现性：
供试品溶液:
重现性：
2. 结论
本文建立了硝磺草酮原药的HPLC测定方法。参照GB 29382—2012硝磺草酮原药的色谱条件，采用色谱柱Shim pack GIST C18（4.6×250mm，5μm）、Shim-pack Scepter C18（4.6×250mm，5μm）、Shim-pack Scepter HD-C18（4.6×250mm，5μm），对硝磺草酮原药供试品、硝磺草酮对照品进行分析，结果显示硝磺草酮峰形对称，且结果重现性较好，满足GB 29382—2012要求。此方法可为硝磺草酮原药的含量测定提供参考。