板蓝根颗粒中鸟苷、尿苷和腺苷的测定
SGLC-LC-334
摘要:本文建立了板蓝根颗粒中鸟苷、尿苷和腺苷的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》中板蓝根颗粒含量测定的色谱条件,采用色谱柱Shim-pack GIST C18-AQ分析,结果显示,尿苷、鸟苷、腺苷的峰形良好,3个目标成分与相邻杂质基线分离,理论塔板数以尿苷峰计算远大于10000,满足药典要求。此方法可为板蓝根颗粒的含量测定提供参考。
关键词:板蓝根颗粒 尿苷 鸟苷 腺苷 含量测定 Shim-pack GIST C18-AQ HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
色谱柱:Shim-pack GIST C18-AQ(5 μm,4.6×250 mm;P/N:227-30742-08);
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 对照品溶液的制备
取尿苷对照品、鸟苷对照品及腺苷对照品适量,精密称定,加5%甲醇制成每1 mL含尿苷20μg、鸟苷20 μg及腺苷25 μg的混合溶液,即得。
1.3 供试品溶液的制备
取板蓝根颗,研细,取1 g(约相当于饮片1.4 g),精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入5%甲醇10 mL,密塞,称定重量,超声处理(功率500 W,频率40 kHz)5分钟,放冷,再称定重量,用5%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:Shim-pack GIST C18-AQ(5 μm,4.6×250 mm;P/N:227-30742-08);
流 速:0.8 mL/min
进样量:5 μL
柱 温:25 ℃
检测器:PDA,254 nm
流动相:A:水;B:甲醇
梯度条件:
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液和供试品溶液色谱图如下:
对照品溶液:
供试品溶液:
供试品溶液重现性
3. 结论
本文建立了板蓝根颗粒中鸟苷、尿苷和腺苷的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》中板蓝根颗粒含量测定的色谱条件,采用色谱柱Shim-pack GIST C18-AQ分析,结果显示,尿苷、鸟苷、腺苷的峰形和分离度良好,理论塔板数以尿苷峰计算远大于10000,满足药典要求。此方法可为板蓝根颗粒的含量测定提供参考。